蛋白質(zhì)含量的測定方法有哪些 蛋白質(zhì)含量的測定方法有哪些,其優(yōu)缺點是什么

蛋白質(zhì)含量測定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等 。
1、微量凱氏定氮法:含氮有機物即分解產(chǎn)生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸銨 。經(jīng)強堿堿化使之分解放出氨 , 借蒸汽將氨蒸至酸液中 , 根據(jù)此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量 。
2、雙縮脲法:雙縮脲是兩個分子脲經(jīng)180℃左右加熱,放出一個分子氨后得到的產(chǎn)物 。在強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物,稱為雙縮脲反應 。
3、folin―酚試劑法:這種蛋白質(zhì)測定法是最靈敏的方法之一 。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代 。
4、考馬斯亮蘭法:1976年由bradford建立的考馬斯亮蘭法,是根據(jù)蛋白質(zhì)與染料相結(jié)合的原理設計的 。這一方法是目前靈敏度最高的蛋白質(zhì)測定法 。
【蛋白質(zhì)含量的測定方法有哪些 蛋白質(zhì)含量的測定方法有哪些,其優(yōu)缺點是什么】5、紫外吸收法:蛋白質(zhì)分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)含有共軛雙鍵,使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì) 。吸收高峰在280nm處,其吸光度(即光密度值)與蛋白質(zhì)含量成正比 。
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